IN VITRO INDUCED MUTATION OF STEMONA COLLINSIAE CRAIB USING ETHYL METHANESULFONATE

Abstract

The root extracts of Stemona collinsiae Craib can be used in the treatment of various diseases and can also be effective in eliminating pests. Therefore, this species has been developed and selected to improve yields. However, it was found that the improved forms were unstable. The purposes of this research are as follows: (1) to optimize the shoot and root induction medium (2) to determine the concentration of ethyl methanesulphonate (EMS), as well as the length of time it took, for this to be lethal to 50% of shoots; and (3) to analyze the genetic variation between mutated plants and the mother plant of S. collinsiae Craib using molecular markers. The results revealed that adventitious shoots developed on MS medium supplemented with 0, 1, 3, 5 and 7 mg/l BA, and that all concentrations showed significant differences (Pสารสกัดจากรากของหนอนตายหยากดอกสั้น (Stemona collinsiae Craib) มีคุณสมบัติในการรักษาโรคและกำจัดแมลงศัตรูพืชจึงมีการปรับปรุงพันธุ์เพื่อให้ได้ผลผลิตตามความต้องการอย่างต่อเนื่อง แต่กลับพบว่าสารสกัดที่ได้ไม่เสถียร และมีโครงสร้างเปลี่ยนแปลงได้ง่าย งานวิจัยนี้จึงมีวัตถุประสงค์ คือ 1) ศึกษาสูตรอาหารที่เหมาะสมต่อการชักนำยอดและรากของหนอนตายหยากดอกสั้นในหลอดทดลอง 2) ศึกษาความเข้มข้นและระยะเวลาในการแช่สาร EMS ที่เหมาะสมต่อการชักนำให้เกิดการตาย 50 เปอร์เซ็นต์ และ 3) วิเคราะห์ความแปรปรวนทางพันธุกรรมระหว่างยอดกลายพันธุ์กับต้นแม่ของหนอนตายหยากดอกสั้นโดยใช้เครื่องหมายโมเลกุล ผลการศึกษาพบว่าการชักนำการเกิดยอดโดยใช้อาหารสูตร Murashige and Skoog (MS) ที่เติมสารควบคุมการเจริญเติบโต 6-benzyadenine (BA) ความเข้มข้น 0, 1, 3, 5 และ 7 มิลลิกรัมต่อลิตร พบว่าอาหารสูตร MS ที่เติมสารควบคุมการเจริญเติบโตในทุกระดับความเข้มข้นให้จำนวนยอดเฉลี่ยแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ (P