THE DEVELOPMENT OF PROBIOTIC MOUTHWASH FORMULATION WITH CANNABIS EXTRACTS ON THE REDUCTION OF PROINFLAMMATORY CYTOKINE : TNF-ALPHA LEVEL.

Abstract

This study is aimed evaluating the effects of a probiotic mouthwash containing cannabis extracts (CBD) on the reduction of tumors Necrosis Factor Alpha (TNF-α) levels. There were eight probiotic mouthwashes prepared by infusing cannabis extract (CBD) with the concentration varied from 0.5-1.0 v/v. The test for TNF- α reduction was performed using a lipopolysaccharide (LPS) model to activate type THP-1 human monocytic cell line (ATCC, TIB202) to produce TNF- α. To assess the TNF-α level reduction, the ELISA technique was performed. The results revealed that a probiotic mouthwash containing CBD could reduce the TNF-α level, regardless of its concentration when compared to the control. The optimum ratio which could reduce the TNF-α level was in preparation 1: 0.25%, CBD, 10% probiotic supernatant and mouthwash ingredient; preparation 2: 0.5% CBD, 10% probiotic supernatant and mouthwash ingredient; preparation 3: 1% CBD, 10% probiotic supernatant and mouthwash ingredient; preparation 7: 10% probiotic supernatant and mouthwash ingredient; and preparation 8: mouthwash ingredient, at an almost similar level of inhibition at 85-86%. For preparation 4: 0.25% CBD and 10% probiotic supernatant; and preparation 5: 0.5% CBD and 10% probiotic supernatant; and preparation 6: 1% CBD and 10% probiotic supernatant, with inhibitions at 9.86%, 53.84% and 76.10%, respectively. Therefore, a probiotic mouthwash with CBD can reduce TNF-α levels and could potentially be applied in clinical usage.

การศึกษาในครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของน้ำยาบ้วนปากโพรไบโอติก ผสมสารสกัดจากกัญชา (แคนนาบิไดออล,CBD) ต่อการลดระดับของทูเมอร์เน็คโครติกแฟคเตอร์อัลฟ่า (TNF-α) โดยเริ่มจาก เตรียมน้ำยาบ้วนปากจากน้ำเลี้ยงโพรไบโอติกติกสายพันธุ์ L. paracasei MSMC39-1 ผสมสารสกัดจากกัญชา (CBD) ที่มีความเข้มข้นของ CBD ตั้งแต่ 0.5-1.0 ปริมาตร/ปริมาตร จำนวน 8 สูตร มาทดสอบความสามารถในการลดระดับสารสื่ออักเสบชนิด TNF-α โดยใช้โมเดลในการกระตุ้น human monocytic cell line (ATCC, TIB202) ชนิดTHP-1 ด้วยลิโพพอลิแซ็กคาไรด์บริสุทธิ์ (LPS) ให้เกิดการหลั่งTNF-α และวัดความสามารถในการยับยั้งการหลั่ง TNF-α ของน้ำยาบ้วนปากแต่ละสูตรด้วยวิธี ELISA พบว่าน้ำยาบ้วนปากโพรไบโอติก ผสมสารสกัดจากกัญชา (CBD) มีความสามารถในการลดระดับ TNF-α ได้เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม โดยพบว่าน้ำยาบ้วนปากสูตรที่ 1 (น้ำยาบ้วนปากที่มีส่วนผสมแคนนาบิไดออล ร้อยละ 0.25, น้ำเลี้ยงโพรไบโอติก ร้อยละ 10 และส่วนประกอบอื่นๆของน้ำยาบ้วนปาก), สูตรที่ 2 (น้ำยาบ้วนปากที่มีส่วนผสมแคนนาบิไดออล ร้อยละ 0.5, น้ำเลี้ยงโพรไบโอติก ร้อยละ 10 และส่วนประกอบอื่นๆของน้ำยาบ้วนปาก), สูตรที่ 3 (น้ำยาบ้วนปากที่มีส่วนผสมแคนนาบิไดออล ร้อยละ 1, น้ำเลี้ยงโพรไบโอติก ร้อยละ 10 และส่วนประกอบอื่นๆของน้ำยาบ้วนปาก), สูตรที่ 7 (น้ำยาบ้วนปากที่มีส่วนผสมน้ำเลี้ยงโพรไบโอติก ร้อยละ 10 และส่วนประกอบอื่นๆของน้ำยาบ้วนปาก) และน้ำยาบ้วนปากสูตรที่ 8 (น้้ำยาบ้วนปากที่มีส่วนผสมอื่นๆของน้ำยาบ้วนปาก) สามารถลดระดับสารสื่ออักเสบได้ใกล้เคียงกันที่ 85-86% สูตรที่ 4 (น้ำยาบ้วนปากที่มีส่วนผสมแคนนาบิไดออล ร้อยละ 0.25 และน้ำเลี้ยงโพรไบโอติก ร้อยละ 10), สูตรที่5 (น้ำยาบ้วนปากที่มีส่วนผสมแคนนาบิไดออล ร้อยละ 0.5 และน้ำเลี้ยงโพรไบโอติก ร้อยละ 10 ; 0.5%CBD) และสูตรที่ 6 (น้ำยาบ้วนปากที่มีส่วนผสมแคนนาบิไดออล ร้อยละ 1 และน้ำเลี้ยงโพรไบโอติก ร้อยละ 10) ลดได้ที่ 9.86%, 53.84% และ 76.10% ตามลำดับ จากผลการทดลองครั้งนี้ชี้ให้เห็นว่าน้ำยาบ้วนปากโพรไบโอติก ผสมสารสกัดจากัญชา (CBD) มีความสามารถในการลดระดับ TNF-α และมีศักยภาพในการนำไปประยุกต์ใช้ทางคลินิกได้ต่อไป